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TMB是一种优于OPD的新型HBP底物。TMB经HRP作用后呈现蓝色，加入硫酸终止反应后，变为黄色，最大吸收峰波长为450mm。TMB具有稳定性好、呈色过程无需避光、无致癌性等优点，目前已成为ELISA中最常用的底物。