糖异生是指由简单的非糖前体（乳酸、甘油、生糖氨基酸等）转变为糖（葡萄糖或糖原）的过程。糖酵解中有三步反应是不可逆反应，在糖异生时必须绕过这三步反应。这三步反应分别是：①葡萄糖经己糖激酶催化生成6磷酸葡萄糖；②磷酸果糖经磷酸果糖激酶催化生成1，6二磷酸果糖；③磷酸烯醇式丙酮酸经丙酮酸激酶生成丙酮酸。可见丙酮酸激酶不参与糖异生的过程。故选A。