糖酵解途径中大多数反应是可逆的，但有3个反应基本上不可逆，分别由己糖激酶（或葡萄糖激酶），6-磷酸果糖激酶-1和丙酮酸激酶催化，是糖酵解途径流量的3个调节点，所以被称为关键酶。在体内，关键酶的活性受到代谢物（包括ATP、ADP）和激素（如胰岛素和胰高血糖素）等的周密调控。