波长200~300nm的紫外线具有杀菌作用，其中以265~266nm最强，这与DNA的吸收光谱范围一致。紫外线主要作用于DNA，使一条DNA链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合而形成二聚体，干扰DNA的复制与转录，导致细菌的死亡或变异。紫外线穿透力较弱，对人的眼睛和皮肤有损伤作用，主要适用于病房、无菌室、手术室、实验室空气和地面等的消毒，或用于不耐热物体表面的消毒。