瑞氏染料亚甲蓝容易氧化为一二三甲基硫堇等次级染料（即天青）。将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料，由酸性染料伊红（E－）和碱性染料亚甲蓝（M＋）组成。Ⅱ液磷酸盐缓冲液pH为6.4～6.8。在偏碱性环境中负电荷增多，易与亚甲蓝结合，所有细胞呈灰蓝色，颗粒呈深暗，嗜酸性颗粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性颗粒偏粗，呈紫黑色。