血细胞内的氯乙酸AS-D萘酚酯酶（NAS-DCE）将基质液中的氯乙酸AS-D萘酚水解，产生萘酚AS-D，进而与基质液中的重氮盐（常用坚牢紫酱GBC）偶联，形成不溶性红色沉淀，定位于胞质内。原粒细胞为阴性或弱阳性反应，自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均呈阳性反应，以早幼粒和中幼粒细胞阳性反应最强，但酶活性并不随着细胞的成熟而增强，反而是逐渐减弱；嗜酸性粒细胞为阴性或弱阳性反应，嗜碱性粒细胞为阳性反应；氯乙酸AS-D萘酚酯酶几乎只出现在粒细胞中，其特异性高，又称“粒细胞酶”或“特异性酶”。单核细胞为阴性反应，个别可呈弱阳性反应；淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞和血小板均呈阴性反应。